مقایسه کارایی روش استخراج بافر-دترجنت با روش استاندارد نمکی برای تخلیص dna از نمونه های خون و اسپرم
نویسندگان
چکیده
استخراج dna ژنومی با کمیت و کیفیت مطلوب از نیازهای اساسی زیست شناسی مولکولی است. بیشتر روش-های تجاری استخراج dna زمان بر هستند و با استفاده از آنزیم ها (مانند پروتئیناز k) و حلال های آلی سمی (مانند فنل و کلروفرم) انجام می شوند. از آنجایی که این آنزیم ها گران قیمت و مواد شیمیایی مورد استفاده مضرند، به یک روش استخراج dna که این معایب را نداشته باشد، نیاز است. این تحقیق به منظور مقایسه روش استخراج بافر-دترجنت با روش استخراج نمکی در گونه های مختلف، شامل نمونه های خون گاو، گوسفند، بز و مرغ، و نمونه های اسپرم گاو و قوچ، انجام شد. برای استخراج dna و مقایسه دو روش، از 366 نمونه خون و 26 نمونه اسپرم استفاده شد. پارامترهای کمیت و کیفیت با استفاده از نانودراپ و ژل آگارز 1% و بازدهی واکنش زنجیره ای پلی مراز (pcr)، در هر دو روش ارزیابی شدند. پارامترهای غلظت و خلوص dna استخراج شده با روش استخراج با شوینده های تجاری به ترتیب 198±8/623 و 05/0±87/1 و با روش استخراج نمکی به ترتیب 178±1/413 و 042/0±82/1 بود. dnaهای استخراج شده با هر دو روش pcr موفقی داشتند که مطرح کننده فقدان ممانعت کننده ها در واکنش است. نتایج الکتروفورز فقدان شکستگی در نمونه ها را تأیید کرد. تحقیق حاضر نشان داد که استخراج dna با روش بافر-دترجنت نتایج مطلوبی دارد و در نتیجه، روش بافر-دترجنت بهینه یک روش سریع، ایمن و ارزان است و dna استخراج شده با این روش کمیت و کیفیت بالایی دارد. به نظر می رسد این روش برای استخراج dna از نمونه های خون و اسپرم در آزمایشگاه های مولکولی مناسب است. واژه های کلیدی: استخراج dna؛ روش بافر-دترجنت؛ کمیت و کیفیت dna؛ pcr.
منابع مشابه
استخراج DNA از ریشه مو با روش نمکی بهینه یافته
The reliability and performance of the molecular diagnostic assays such as polymerase chain reaction (PCR), enzyme digestion and other applications are influence by quantity and quality of the extracted DNA strongly. Furthermore, to choose suitable and optimal tissue for genomic experiments nevertheless consider quantity and quality of the extracted DNA, we need to consider the comfort of sampl...
متن کاملبررسی و مقایسه روشهای استخراج DNA از نمونه خون و اسلایدهای مغز استخوان و خون محیطی
Introduction: DNA extraction methods are very important for genetics research and diagnostic tests. In These methods are also important for detecting genetic diseases or in cancers for investigating genetic changes during cancer progression or treatment. Therefore, selection of the best method for DNA extraction from different samples such as bone marrow (BM) or peripheral blood (PB) and their ...
متن کاملمقایسه تأثیر وضعیت طاق باز و دمر بر وضعیت تنفسی نوزادان نارس مبتلا به سندرم دیسترس تنفسی حاد تحت درمان با پروتکل Insure
کچ ی هد پ ی ش مز ی هن ه و فد : ساسا د مردنس رد نامرد ي سفنت سرتس ي ظنت نادازون داح ي سکا لدابت م ي و نژ د ي سکا ي د هدوب نبرک تسا طسوت هک کبس اـه ي ناـمرد ي فلتخم ي هلمجزا لکتورپ INSURE ماجنا م ي دوش ا اذل . ي هعلاطم ن فدهاب اقم ي هس عضو ي ت اه ي ندب ي عضو رب رمد و زاب قاط ي سفنت ت ي هـب لاتـبم سراـن نادازون ردنس د م ي سفنت سرتس ي لکتورپ اب نامرد تحت داح INSURE ماجنا درگ ...
متن کاملمعرفی یک روش جهت استخراج DNA از اکتینومایست های هوازی
سابقه و هدف: استخراج DNA از اکتینومیست های هوازی به دلیل پیچیدگی ساختمان دیواره سلولی آنها با روش های روتین برای استخراج DNA متفاوت است. در این مطالعه از روش جوشاندن به همراه محلول STET buffer برای استخراجDNA از این باکتری ها استفاده گردید. مواد و روش ها: با استفاده از محلول STET buffer ، ژنوم میکروارگانیسم ها استخراج گردید. کیفیت و کمیت DNA استخراج شده، با استفاده از اسپکتروفوتومتر و الکتر...
متن کاملمقایسه استخراج DNA به دو روش Chelex و فنل کلروفرم از بلوک های پارافینی سرطانی
زمینه و هدف: بررسی تغییرات ژنتیکی در سرطان ها از دید مولکولی جهت تشخیص، پیگیری و درمان، لازم و ضروری است. برای انجام کارهای مولکولی اولین قدم استخراج DNA است. به کارگیری روش های عملی آسان و ارزان که بتواند استخراج DNA را برای کارهای مولکولی آسان تر کند، مفید خواهد بود معمولا پس از جراحی، نمونه های سرطانی به طور روتین در فرمالین ثابت و در پارافین قالب گیری می شوند و استخراج DNA با کیفیت مناسب از...
متن کاملارزیابی روش های مختلف استخراج DNA از کیست ژیاردیا لامبلیا
Background and purpose: Giardia lamblia (G.lamblia) is one of flagellated protozoan pathogens. Giardiasis is the most common human parasite infection in the world, causing a lengthy course of diarrhea. The aim of the present study was to compare five different methods of DNA extraction from G.Lamblia cyst and determining the most efficient DNA extraction method. Materials and methods: This stu...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
genetics in the 3rd millenniumجلد ۸، شماره ۴، صفحات ۲۱۵۵-۲۱۶۱
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023